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    足细胞蛋白分子表达的实验研究 肾母细胞瘤hTERT表达及临床意义 马兜铃酸肾病(AAN)患者血中炎症介质 βG及其前体药自杀基因系统对人肾癌细 应用全人类基因组寡核苷酸芯片检测肾透 一氧化氮合酶在肾细胞癌中的表达及临床 人肾细胞构建生物人工肾小管治疗MODS猪 人肾透明细胞癌不同转移潜能单克隆细胞 人肾癌环氧化酶 马兜铃酸所致肾损害中DNA损伤机制的实 转化生长因子β1对人肾间质成纤维细胞 肝细胞生长因子及药物对系膜细胞增殖及 VEGF及其受体在慢性缺血性肾损伤早、晚 维持性血液透析患者外周血单个核细胞核 人原代肾细胞癌转移性和非转移性细胞的 干细胞抗缺血再灌注诱发的肾小管坏死性 目的:利用AdEasy系统构建大鼠糖皮质激素受体(GR)基因重组腺病毒载体,转染大鼠系膜细胞,并通过WesternBlot方法检测GR蛋白的表达。方法:将质粒pcDNA1.Neo—RatGR扩增、胶回收获得的RatGRcDNA双酶切片段插入腺病毒穿梭载体质粒pShuttle-CMV的巨细胞病毒(CMV)启动子下游,构建重组穿梭载体pShuttle-CMV—RatGR,线性化后与骨架载体AdEasy-1在细菌BJ5183内经同源重组得到腺病毒重组质粒pAd—RatGR,经人胚肾293细胞包装后得到复制缺陷型重组腺病毒Ad—RatGR;用包装后的病毒上清转染大鼠肾系膜细胞,提取细胞中的总蛋白,通过WesternBlot方法检测GR蛋白的表达。结果:连接、重组后通过酶切和测序法筛选出pAd—RatGR重组质粒,;经人胚肾293细胞包装,48小时后观察到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)明显表达,氯化铯梯度离心纯化最终获得1×10~9PFU/ml滴度的重组病毒;用该滴度的Ad—RatGR,转染大鼠肾系膜细胞48h后,提取细胞总蛋白,WesternBlot检测,GR蛋白有明显表达。结论:构建的大鼠糖皮质激素受体(GR)基因腺病毒载体能够在大鼠肾系膜细胞(MsC)中表达GR蛋白,并有上调作用。

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